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Table 1 qPCR Primer/probe sets

From: The cooperative function of arginine residues in the Prototype Foamy Virus Gag C-terminus mediates viral and cellular RNA encapsidation

Target

Primer/Probe

5′-3′ sequencea

Cycle conditions

PFV genome (Integrase 1)

fwd

CTTCAACCTTTGCTGAATG

95°C, 8 min, 1×

rev

TAATACAGGGCTATAGGTGT

95°C, 30 s, 40×

probe

FAM-TTGGAATTCAGTACTCCTTATCACCC-BHQ1

58°C, 30 s, 40×

PFV genome (Integrase 2)

fwd

TGCAATTCCAAAGGTGATTC

95°C, 8 min, 1×

rev

TACCTCTTTCCTTTGCCCAT

95°C, 30 s, 40×

probe

FAM-TCAAGGTGCAGCATTCACTTCTTCAA-BHQ1

59°C, 30 s, 40×

EGFP

fwd

GCAGTGCTTCAGCCGCTAC

95°C, 8 min, 1×

rev

AAGAAGATGGTGCGCTCCTG

95°C, 30 s, 40×

probe

HEX-CCGACCACATGAAGCAGCACGACTT-BHQ2

59°C, 30 s, 40×

72°C, 45 s, 40×

GAPDH

fwd

CATCAATGGAAATCCCATCA

95°C, 45 s, 40×

rev

GACTCCACGACGTACTCAGC

95°C, 30 s, 40×

probe

FAM-TCCAGGAGCGAGATCCCTCCA-BHQ1

59°C, 30 s, 40×

72°C, 30 s, 40×

ACTB

fwd

TGGACTTCGAGCAAGAGATG

95°C, 8 min, 1×

rev

GAAGGAAGGCTGGAAGAGTG

95°C, 30 s, 40×

probe

FAM-CGGCTGCTTCCAGCTCCTCC-BHQ1

59°C, 30 s, 40×

72°C, 30 s, 40×

ASB1

primer/probe mix

HS00211548_m1 Gene Expression Kit Applied Biosystems

95°C, 10 min, 1×

95°C, 15 s, 40×

60°C, 1 min, 40×

PGK1

primer/probe mix

HS99999906_m1 Gene Expression Kit Applied Biosystems

95°C, 1 min, 1×

95°C, 15 s, 40×

60°C, 1 min, 40×

PLEKHB2

primer/probe mix

HS00215820_m1 Gene Expression Kit Applied Biosystems

95°C, 10 min, 40×

95°C, 15 s, 40×

60°C, 1 min, 40×

  1. aFam: 6-carboxyfluorescein; HEX: hexachloro-fluorescein; BHQ1: Black Hole Quencher 1; BHQ2: Black Hole Quencher 2.